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對于細(xì)胞培養(yǎng)皿使用方法及實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)您知道嗎
培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室器皿,由一個(gè)平面圓盤狀的底和一個(gè)蓋組成,一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)。塑料的可能是聚乙/烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實(shí)驗(yàn)室接種、劃線、分離細(xì)菌的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿:用于培養(yǎng)細(xì)菌、細(xì)菌繁殖、生長和孵化實(shí)驗(yàn)的培養(yǎng)容器。它常用于實(shí)驗(yàn)室、病房、檢查室等醫(yī)療機(jī)構(gòu)中,并且廣泛應(yīng)用于制造業(yè)和實(shí)驗(yàn)室。培養(yǎng)皿廣泛用于日常實(shí)驗(yàn)、耐受性試驗(yàn)、平板孵育、細(xì)菌學(xué)等,是實(shí)驗(yàn)室研究和生產(chǎn)的重要基本用具。
分類:
根據(jù)培養(yǎng)皿用途的不同可分為細(xì)胞培養(yǎng)皿和細(xì)菌培養(yǎng)皿;
根據(jù)制造材料的不同分為塑料培養(yǎng)皿和玻璃培養(yǎng)皿,但進(jìn)口培養(yǎng)皿和一次性培養(yǎng)皿大都是塑料材料。
根據(jù)大小的不同通??煞譃橹睆綖?5mm,60mm,90mm,150mm培養(yǎng)皿;
根據(jù)分隔的不同又可分為2分隔培養(yǎng)皿,3分隔培養(yǎng)皿等;
培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細(xì)胞的貼壁。塑料的可能是聚乙/烯材料的,有一次性的和多次使用的,適合實(shí)驗(yàn)室接種、劃線、分離細(xì)菌的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。
培養(yǎng)皿和蒸發(fā)皿的區(qū)別:
培養(yǎng)皿由一個(gè)底和一個(gè)蓋組成,一般用來做培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。一般由玻璃或者塑料作成。上蓋有保溫保濕作用。而蒸發(fā)皿是沒有蓋的,是用于蒸發(fā)濃縮溶液或灼燒固體的器皿??诖蟮诇\,有圓底和平底帶柄的兩種。常用的為瓷制蒸發(fā)皿,也有玻璃、石英、鉑等制成的。質(zhì)料不同,耐腐蝕性能不同,應(yīng)根據(jù)溶液和固體的性質(zhì)適當(dāng)選用。
用途:
適用于防疫站、醫(yī)院、生物制品、食品工業(yè)、制藥工業(yè)等單位,用于細(xì)菌的分離培養(yǎng)、抗菌素效價(jià)檢驗(yàn)和定性檢驗(yàn)分析。在農(nóng)業(yè)、水產(chǎn)等科學(xué)研究用于對種子發(fā)牙、植物、昆蟲、魚種的人工培養(yǎng)、孵化研究。電子工業(yè)或其它行業(yè)作為器皿使用。
使用方法:
培養(yǎng)皿的使用首先應(yīng)從清潔上著手,為了保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,必須使用乾凈的培養(yǎng)皿。可以使用消毒劑、蒸汽或高溫對培養(yǎng)皿進(jìn)行清潔消毒,完成后放置在干燥處備用。
其次,在使用培養(yǎng)皿前,必須先清洗并消毒,可以使用酒精或強(qiáng)酸強(qiáng)堿清洗,然后用蒸汽或高溫進(jìn)行消毒,保證培養(yǎng)皿的消毒效果。
最后,培養(yǎng)皿使用過程中,需要注意安全措施,如防止細(xì)菌污染,采用密封條或密封膠對培養(yǎng)皿進(jìn)行密封,以防細(xì)菌污染物進(jìn)入容器。
為了防止細(xì)菌的污染,實(shí)驗(yàn)室必須建立清潔的工作空間,并確保培養(yǎng)皿的清潔。操作時(shí),應(yīng)采取必要的防護(hù)措施,如戴口罩,避免飛濺。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照規(guī)定進(jìn)行消毒,以防止細(xì)菌的污染。
在使用培養(yǎng)皿后,經(jīng)過消毒處理后,應(yīng)適當(dāng)放置并保存。避免不同類型細(xì)菌繁殖混在一起,以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性。細(xì)菌培養(yǎng)完畢后,培養(yǎng)皿可以清洗,進(jìn)行多次循環(huán)使用,以節(jié)約投入的材料成本。
注意事項(xiàng):
1、使用前經(jīng)過清潔消毒,培養(yǎng)皿清潔與否對工作影響較大,可影響培養(yǎng)基的酸堿度,若有某些化學(xué)藥品的存在,會抑制細(xì)菌生長。
2、新購的培養(yǎng)皿應(yīng)先用熱水沖洗,再置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1%或2%的鹽酸溶液中浸泡數(shù)小時(shí),使游離堿性物質(zhì)除去,再用蒸餾水沖洗2次。
3、若要培養(yǎng)細(xì)菌,再用高壓蒸氣(一般6.8*10的5次方Pa高壓蒸氣),120℃的溫度下30min滅菌,置室溫中干燥;或用干熱滅菌,就是將培養(yǎng)皿置于烘箱內(nèi),溫度控制在120℃左右的情況下維持2h,即可殺死細(xì)菌的胞牙。
4、經(jīng)過消毒的培養(yǎng)皿才能接種培養(yǎng)使用;
5、平板培養(yǎng)時(shí)為何把培養(yǎng)皿倒置:
原因:培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)皿中會產(chǎn)生較多的水蒸氣,水蒸氣在皿蓋上凝結(jié)會產(chǎn)生水滴,如果培養(yǎng)皿正置,水滴滴下會將菌落沖散,這樣的話一個(gè)大菌落可能會分散開成為很多小菌落,對細(xì)菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)都造成很大的麻煩。如果倒置的話,培養(yǎng)基在上,皿蓋在下,水滴滴下不會滴到菌落上。
清潔步驟:
一般經(jīng)過浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四個(gè)步驟。
1.浸泡:新的或用過的玻璃器皿要先用清水浸泡,軟化和溶解附著物。新玻璃器皿使用前得先用自來水簡單刷洗,然后用5%鹽酸浸泡過夜;用過的玻璃器皿往往附有大量蛋白質(zhì)和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后應(yīng)立即浸入清水中備刷洗。
2.刷洗:將浸泡后的玻璃器皿放到洗滌劑水中,用軟毛刷反復(fù)刷洗。不要留死角,并防止破壞器皿表面的光潔度。將刷洗干凈的玻璃器皿洗凈、晾干,備浸酸。
3.浸酸:浸酸是將上述器皿浸泡到清潔液中,又稱酸液,通過酸液的強(qiáng)氧化作用清除器皿表面的可能殘留物質(zhì)。浸酸不應(yīng)少于六小時(shí),一般過夜或更長。放取器皿要小心。
4.沖洗:刷洗和浸酸后的器皿都必須用水充分沖洗,浸酸后器皿是否沖洗的干凈,直接影響到細(xì)胞培養(yǎng)的成敗。手工洗滌浸酸后的器皿,每件器皿至少要反復(fù)“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包裝備用。
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