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如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)板?

更新時(shí)間:2022-08-10    點(diǎn)擊次數(shù):941

如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)板?

細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩ā?br/>
(一)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇:

貼壁細(xì)胞一般用平底培養(yǎng)板。懸浮型細(xì)胞的培養(yǎng)一般用V型。

U型培養(yǎng)板亦多用于培養(yǎng)懸浮型細(xì)胞 。V型培養(yǎng)板有時(shí)用做免疫學(xué)血凝集的實(shí)驗(yàn)。

不同型狀的板子自然有不同用途。平底的什麼類型的細(xì)胞都可用﹐但當(dāng)細(xì)胞數(shù)目較少﹐如做克隆時(shí)﹐就用BUNSEN本生96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實(shí)驗(yàn)時(shí)﹐無(wú)論貼壁和懸浮細(xì)胞﹐一般均用平底板。至於U或V型板﹐一般在某些特殊要求時(shí)才使用。如在免疫學(xué)方面﹐當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時(shí)﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細(xì)胞會(huì)由於重力的作用而聚集在一個(gè)很小的範(fàn)圍內(nèi)。V型板的用途更少﹐一般用于細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)時(shí)﹐為了使效靶細(xì)胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗(yàn)也可用U型板替代(加入細(xì)胞後﹐低速離心)如果是養(yǎng)細(xì)胞的話,  通常是選用平底的, 另外要特別注意材質(zhì), 標(biāo)示"Tissue Culture (TC) Treated"就是養(yǎng)細(xì)胞用的。

圓底的好像沒(méi)聽(tīng)說(shuō)過(guò)拿來(lái)養(yǎng)細(xì)胞。 圓底的通常是拿來(lái)做分析, 化學(xué)反應(yīng), 或是保存樣品用的, 因?yàn)閳A底比較好將液體吸得乾淨(jìng), 如果用平底的就不好吸了。 不過(guò), 如果你是要測(cè)吸光值的話, 一定要買(mǎi)平底的才行。

大部分細(xì)胞培養(yǎng)都用平底培養(yǎng)板,便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致,還便于MTT檢測(cè)。

圓底培養(yǎng)板主要用于同位素?fù)饺氲膶?shí)驗(yàn),需要用細(xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng),如“混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)"等。  區(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),但也可以用來(lái)測(cè)蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不能用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測(cè),它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。如下是個(gè)用酶標(biāo)板檢測(cè)冠狀病毒IgM/IgG抗體例子:見(jiàn)網(wǎng)站

常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量:不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2-3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過(guò)多會(huì)影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實(shí)驗(yàn)的目的不同靈活掌握。

培養(yǎng)器皿 面積(cm2)培養(yǎng)液量(ml) 細(xì)胞量

96 孔培養(yǎng)板 0.32 0.1 10e5

24孔培養(yǎng)板 2 1.0 5×10e5

12孔培養(yǎng)板 4.5 2.0 10e6

6孔培養(yǎng)板 9.6 2.5 2.5×10e6

3.5 cm 培養(yǎng)皿 8 3.0 2×10e6

6 cm 培養(yǎng)皿 21 5.0 5.2×10e6

10 cm 培養(yǎng)皿 55 10.0 13.7×10e6

25cm2 培養(yǎng)瓶 25 5.0 5×10e6

75cm2 培養(yǎng)瓶 75 15~30 2×10e7

(一)細(xì)胞培養(yǎng)板的密閉和污染問(wèn)題:

細(xì)胞培養(yǎng)板的加樣和操作:細(xì)胞培養(yǎng)板在進(jìn)行細(xì)胞操作時(shí)同樣遵循嚴(yán)格無(wú)菌的原則,各項(xiàng)操作要規(guī)范、科學(xué),不對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)造成額外的影響。這其中常見(jiàn)的問(wèn)題就是如何加樣后細(xì)胞的均勻和盡量減少換液對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的影響。

如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)板?本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。

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